在许多国家,南美白对虾是水产养殖的主要品种之一。年,据印度尼西亚虾农报告,养殖南美白对虾因出现肌肉坏死症,造成虾出现大量死亡。在年,在巴西、东南亚等几个国家也发现了类似症状。后来,使用标准检测试剂盒,对感染的虾进行研究表明存在IMNV病*(Senapinetal.,)。特别是,感染传染性肌肉坏死病*(IMNV)的虾肌肉呈白化的状态,在腹部末段和尾部比较明显,个别虾体因肌肉坏死还会变红。这种病*,到导致虾的死亡率会瞬间升高,并持续数天。
一、以往养殖户,采用应对IMNV的措施。
为了防止IMNV感染的蔓延,在对虾养殖中采取了多种措施:比如:高效的管理、采用无特定病原体的虾苗...然而,对病*有限的认识,限制控制病*的成功率。
一种最有希望的预防疾病的方法是,通过免疫刺激剂加强对虾的防御机制(Kaleeswaranetetal.,)。因为免疫刺激剂,可增强针对感染性疾病的特异性和非特异性免疫。为了获得最佳免疫刺激剂的性能,以提高免疫反应和减少疾病影响,已经进行了各种研究。(Jhaetal.,)成功开发了从10种植物中提取精油混合物,作为饲料添加剂方,并测定了其对WSSV病*的有效性。
狗牙根(Cynodondactylon)广泛分布于世界各地。这种草本植物以其治疗癔症、癫痫和精神错乱的能力而闻名。(Kaleeswaranetal.,)的研究还表明,狗牙根还可以用于净化血液、无尿、胆汁、结膜炎、腹泻、淋病、瘙痒和胃痛等症状;(Balasubramanianetal.,)的研究表明,狗牙根经过乙醇提取获得的提取物,能够提高斑节对虾对WSSV病*的抵抗力。
因此,本研究旨在研究,在饲料当中添加了狗牙根的乙醇提取物,对南美对虾IMNV病*的抑制效果。
二、材料制备与研究设置
1、将采集好的狗牙根,去根、清洁、干燥后,再用电动搅拌机将狗牙根研成粉末状,最后通过乙醇提取法,获得狗牙根的乙醇提取物。
2、在使用饲料前,先将狗牙根提取物以10mg/kg,15mg/kg,20mg/kg和25mg/kg的浓度,喷洒到工业饲料中上,待30分钟饲料吸收后,即可给南美白对虾投喂。
3、该研究一共进行27天,先将购买来的南美白对虾苗分为5组,先让虾苗适应3天(不投饵料),然后进行12天的投料期;从16开始,让虾苗感染IMNV病*,再分别采用5种饲料(一种为对照组,不添加狗牙根提取物;另外4种在饲料当中添加10mg/kg,15mg/kg,20mg/kg和25mg/kg浓度的狗牙根提取物),待研究结束,统计其生长参数和存活率。
三、结果与讨论
对年来自东爪哇的虾标本的IMNV进行PCR测序后,证实印度尼西亚南美白对虾是感染了IMNV(Senapinetal.,)。随后的分析显示,印度尼西亚的IMNV样本与巴西IMNV的核酸序列一致度为99.6%。特别该病可以影响虾的任何生长阶段(主要是日龄30天-90天)。(Nur,年)的研究还显示,该病*暴发似乎并不取决于季节。
为控制WSSV病*的传播,保护养殖对虾免受WSSV病*的侵害,研制了抗病*草药提取物。在我们之前的研究中,狗牙根提取物的应用具有抗WSSV的特性,保护虾免受WSSV感染。因此,本研究试图探讨狗牙根提取物对抗IMNV病*的作用。
1、研究结束后,发现对照组的累积死亡率最高(%)。其他采用狗牙根提取物组从感染后第4天开始观察死亡率。南美白对虾存活率最高的是25%和20%狗牙根提取物组(图1),其次是10%和15%的狗牙根提取物组。这个说明,狗牙根提取物具有保护对虾免受IMNV病*侵袭的能力,并能减轻对虾疾病症状的出现。
图1、5组南美白对虾,在感染IMNV之后的存活率。
图2:实验当中南美白对虾的累积死亡率。
2、水质参数每日检查两次,浮游生物总数每5天检查一次。结果表明,处理组与对照组在各参数上均无显著差异。结果表明,狗牙根提取物对水质和浮游生物没有影响。
四、研究结论
在这项研究中,取得结果是非常令人鼓舞。我们观察到,在饲料当中添加(20mg/kg)的狗牙根提取物时,对91.1%的南美白对虾起到保护作用。但是,在添加浓度为(15mg/kg)最多可以保护78%的对虾。因此,可以得出结论,必须添加狗牙根提取物浓度为(20mg/kg)或更高,才能完全保护南美白对虾免受IMNV的侵害。
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